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上海研域生物大鼠ELISA試劑盒的操作步驟與方法
更新時(shí)間:2025-11-11   點(diǎn)擊次數(shù):766次

隨著科研大鼠ELISA試劑盒產(chǎn)品ELISA試劑盒供應(yīng)商的增多,困擾客戶(hù)的問(wèn)題也隨之出現(xiàn),比如原裝ELISA試劑盒與分裝ELISA試劑盒的區(qū)別,產(chǎn)品的代測(cè)情況,本公司擁有一對(duì)一全程指導(dǎo)服務(wù),為客戶(hù)排憂解難,


大鼠ELISA試劑盒


試劑盒的操作方法:

本方法首先將特異性抗體吸附于固相載體表面,我們把抗原和抗體吸附到固相載體表面的這個(gè)過(guò)程,稱(chēng)為包被,也可叫做致敏。經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標(biāo)記抗原和被測(cè)抗原的混合液,而另一組只加酶標(biāo)記抗原,再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色,這兩組底物降解量之差,即為我們所要測(cè)定的未知抗原的量。

1.包被抗體:用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至*適濃度(1~10μg/ml),每凹孔加0.3ml,4℃過(guò)夜,或37℃水浴3小時(shí),貯存冰箱。

2.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。

3.分2組,a組加酶標(biāo)記抗原和被檢抗原Elisa試劑盒混合液0.2ml,b組只加酶標(biāo)記抗原液0.2ml,37℃作用1~2小時(shí)。(混合液可作成不同稀釋度)

4.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。

5.加入0.2 ml底物溶液于每個(gè)凹孔(OPD或OT),室溫作用30分鐘(另作一空白對(duì)照,0.4ml底物加0.1ml終止劑)。

6.加終止劑:每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。

7.用酶標(biāo)比色計(jì)測(cè)定a、b兩組OD值,并求出a、b、OD值的差數(shù)。

試劑盒的注意事項(xiàng):

1.干冰是固體二氧化碳,溫度為零下78℃,濕冰就是冰的溫度,一般為冷凍條件的溫度,如在零下20℃冷凍的冰的溫度為零下20℃。對(duì)于一些酶類(lèi)等蛋白產(chǎn)品,需要干冰運(yùn)輸,其他大多數(shù)生化試劑采用濕冰即可;

2.運(yùn)輸常溫試劑的時(shí)候,不需要冰。對(duì)于需要冷藏的試劑,在用冰運(yùn)輸?shù)臅r(shí)候,要把試劑同冰之間有隔離物,不能直接接觸試劑包裝,如試劑外面加裝盒子,在盒子外面加冰,基本都采用冰塊,不能直接用水結(jié)成的冰,因?yàn)楸诨髸?huì)形成水,容易污染試劑。加冰塊的量沒(méi)有嚴(yán)格限制,以試劑Elisa試劑盒四周都處于冰塊包圍為宜;

3.不要小看生物試劑的量,很多抗體類(lèi)試劑、酶類(lèi)試劑是很貴的,可以達(dá)到上千元/mg(即每公斤幾百,上千萬(wàn)元),其保存條件也是很?chē)?yán)格的,否則容易失去活性。運(yùn)輸?shù)臅r(shí)候建議使用冰塊,而非碎冰,

主要原因:(1)碎冰的溫度高,而冰塊的溫度更低;(2)冰塊可以更長(zhǎng)時(shí)間的保持低溫;(3)碎冰容易化成水。

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上海通蔚生物科技有限公司

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